Éditeur(s) : HAL CCSD Elsevier
Résumé : International audience
Background & Aims: The severity of liver diseases is exacerbated by the death of hepatocytes, which can be induced by the sensing of pathogen associated molecular patterns (PAMPs) derived from the gut microbiota. The molecular mechanisms regulating these cell death pathways are poorly documented. In this study, we investigated the role of the receptor interacting protein kinase 1 (RIPK1), a protein known to regulate cell fate decisions, in the death of hepatocytes using two in vivo models of PAMP-induced hepatitis. Methods: Hepatitis was induced in mice by independent injections of two different bacterial PAMPs: lipopolysaccharide (LPS) and unmethylated CpG oligodeoxynucleotide (CpG-DNA) motifs. The role of RIPK1 was evaluated by using mice specifically lacking RIPK1 in liver parenchymal cells (Ripk1(LPC-KO)). Administration of liposome-encapsulated clodronate served to investigate the role of Kupffer cells in the establishment of the disease. Etanercept, a tumor necrosis factor (TNF)-decoy receptor, was used to study the contribution of TNF-alpha during LPS-mediated liver injury. Results: Whereas RIPK1 deficiency in liver parenchymal cells did not trigger basal hepatolysis, it greatly sensitized hepatocytes to apoptosis and liver damage following a single injection of LPS or CpG-DNA. Importantly, hepatocyte death was prevented by previous macrophage depletion or by TNF inhibition. Conclusions: Our data highlight the pivotal function of RIPK1 in maintaining liver homeostasis in conditions of macrophage-induced TNF burst in response to PAMPs sensing. Lay summary: Excessive death of hepatocytes is a characteristic of liver injury. A new programmed cell death pathway has been described involving upstream death ligands such as TNF and downstream kinases such as RIPK1. Here, we show that in the presence of LPS liver induced hepatic injury was due to secretion of TNF by liver macrophages, and that RIPK1 acts as a powerful protector of hepatocyte death. This newly identified pathway in the liver may be helpful in the management of patients to predict their risk of developing acute liver failure. (C) 2017 European Association for the Study of the Liver. Published by Elsevier B.V. All rights reserved.
ISSN: 0168-8278

hal-01532060
https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01532060
DOI : 10.1016/j.jhep.2017.01.005
PUBMED : 28088582

Éditeur(s) : HAL CCSD Publisher : Paris : Baillière [1980-. Latest Publisher : Paris : Elsevier
Résumé : National audience
Introduction Les monocytes sont constitués de populations cellulaires hétérogènes aux propriétés distinctes. Il est retrouvé une sur-représentation de la population monocytaire CD14+/CD16+ pro-inflammatoire au cours de certaines connectivites. Cette population monocytaire s’oppose aux monocytes CD14+/CD16– qui jouent un moindre rôle dans l’amplification de la réponse inflammatoire. Les monocytes et les macrophages pourraient jouer un rôle central dans les mécanismes de fibrose au cours de la sclérodermie systémique. L’association entre les manifestations cliniques de la sclérodermie systémique et les différentes populations monocytaires reste à préciser. L’objectif de cette étude « proof of concept »est d’évaluer l’association entre la population monocytaire CD14+/CD16+ et les manifestations cliniques de fibrose chez les patients sclérodermiques. Patients et méthodes Cinquante-cinq patients répondant aux critères ACR 2013 de sclérodermie systémique ont été inclus de manière consécutive de mars à juillet 2015. Les atteintes fibrosantes ont été évaluées simultanément selon les données du bilan viscéral annuel en centre de compétence : l’atteinte cutanée était évaluée cliniquement selon le score de Rodnan modifié, les patients étaient classés selon la classification de Leroy (atteinte cutanée diffuse, atteinte cutanée limitée, sine scleroderma). La présence d’une pneumopathie interstitielle diffuse était évaluée par TDM thoracique, son retentissement sur la fonction respiratoire était précisé par les épreuves fonctionnelles respiratoires (capacité pulmonaire totale, capacité vitale forcée, DLCO). La NFS réalisée le jour du bilan viscéral était traitée en hématoflow permettant de préciser les sous populations monocytaires en fonction de leur statut CD16+ ou CD16–. Les données cliniques étaient relevées en aveugle vis-à-vis des données de cytométrie en flux. Résultats 55 patients sclérodermiques ont été inclus. Le taux moyen de monocytes CD16+ était de 0,054 G/L (SD = 0,029). Les patients avec une atteinte cutanée diffuse avaient des taux significativement plus élevés de monocytes CD16+ (p = 0,021), alors que les taux de monocytes CD16–ne différaient pas entre les patients avec atteinte cutanée diffuse et cutanée limitée. Le score de Rodnan modifié était corrélé de manière significative avec le taux de monocytes CD16+ (R = 0,513, p < 0,001). Il existait une tendance à l’association entre des taux élevés de CD16+ et la présence d’une pneumopathie interstitielle diffuse détectée par TDM (p = 0,113). Il existait une corrélation négative significative (p < 0,05) entre les taux de CD16+ et les résultats des épreuves fonctionnelles respiratoires (capacité pulmonaire totale et DLCO), attestant d’une fonction respiratoire moins bonne chez les patients à taux plus élevés de monocytes CD16+. Il n’était pas retrouvé d’association entre les taux de CD16+ et les autres paramètres cliniques ou immunologiques. Discussion Cette étude « proof of concept » semble montrer une association entre des taux élevés de monocytes CD16+ et certains paramètres de gravité des atteintes fibrosantes de la maladie. En plus de leur association à la gravité des atteintes fibrosantes de la sclérodermie systémique, les taux de monocytes CD16+ pourraient également avoir un intérêt pronostique qui reste à évaluer. Des travaux in vitro ont montré que l’ajout de TGFb au milieu de culture cellulaire de monocytes induisait une augmentation de l’expression du CD16+ par ces monocytes. Les monocytes CD16+ sont également une source de production d’IL-1 bêta et de TNF alpha pro-inflammatoires. D’autres travaux in vitro ont très récemment démontré la plus grande capacité des monocytes CD16+ à se différencier préférentiellement en macrophages ayant également des propriétés pro-inflammatoires. La sous-population monocytaire CD16+ peut également être hiérarchisée en fonction de l’intensité d’expression du CD16. La place précise de ces différentes populations monocytaires dans la physiopathologie de la sclérodermie systémique reste encore à déterminer. Les liens ténus entre monocytes et macrophages, dont l’implication est maintenant reconnue au cours de la sclérodermie invitent à investiguer davantage le rôle possible du monocyte dans le cadre de cette maladie inflammatoire et fibrosante afin d’identifier d’éventuelles nouvelles cibles thérapeutiques ou marqueurs pronostiques. Conclusion Dans cette étude « proof of concept », sur un nombre restreint de patients atteints de sclérodermie systémique répondants aux critères ACR 2013, le taux de monocytes CD16+ semble corrélé avec les atteintes fibrosantes de la maladie, laissant supposer une implication possible de cette sous-population monocytaire dans la physiopathologie de cette connectivite
ISSN: 0248-8663

hal-01321851
https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01321851
DOI : 10.1016/j.revmed.2016.04.253

Éditeur(s) : HAL CCSD Nature Publishing Group
Résumé : International audience
Cell death of hepatocytes is a prominent characteristic in the pathogenesis of liver disease, while hepatolysis is a starting point of inflammation in hepatitis and loss of hepatic function. However, the precise molecular mechanisms of hepatocyte cell death, the role of the cytokines of hepatic microenvironment and the involvement of intracellular kinases, remain unclear. Tumor necrosis factor alpha (TNF-α) is a key cytokine involved in cell death or survival pathways and the role of RIPK1 has been associated to the TNF-α-dependent signaling pathway. We took advantage of two different deficient mouse lines, the RIPK1 kinase dead knock-in mice (Ripk1K45A) and the conditional knockout mice lacking RIPK1 only in liver parenchymal cells (Ripk1LPC-KO), to characterize the role of RIPK1 and TNF-α in hepatitis induced by concanavalin A (ConA). Our results show that RIPK1 is dispensable for liver homeostasis under steady-state conditions but in contrast, RIPK1 kinase activity contributes to caspase-independent cell death induction following ConA injection and RIPK1 also serves as a scaffold, protecting hepatocytes from massive apoptotic cell death in this model. In the Ripk1LPC-KO mice challenged with ConA, TNF-α triggers apoptosis, responsible for the observed severe hepatitis. Mechanism potentially involves both TNF-independent canonical NF-κB activation, as well as TNF-dependent, but canonical NF-κB-independent mechanisms. In conclusion, our results suggest that RIPK1 kinase activity is a pertinent therapeutic target to protect liver against excessive cell death in liver diseases. © The Author(s) 2016.
ISSN: 2041-4889

hal-01414916
https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01414916
DOI : 10.1038/cddis.2016.362
PUBMED : 27831558

Éditeur(s) : HAL CCSD American Physiological Society
Résumé : International audience
The IL-33/ST2 axis plays a protective role in T-cell-mediated hepatitis, but little is known about the functional impact of endogenous IL-33 on liver immunopathology. We used IL-33-deficient mice to investigate the functional effect of endogenous IL-33 in concanavalin A (Con A)-hepatitis. IL-33(-/-) mice displayed more severe Con A liver injury than wild-type (WT) mice, consistent with a hepatoprotective effect of IL-33. The more severe hepatic injury in IL-33(-/-) mice was associated with significantly higher levels of TNF-alpha and IL-1 beta and a larger number of NK cells infiltrating the liver. The expression of Th2 cytokines (IL-4, IL-10) and IL-17 was not significantly varied between WT and IL-33(-/-) mice following Con A-hepatitis. The percentage of CD25(+) NK cells was significantly higher in the livers of IL-33(-/-) mice than in WT mice in association with upregulated expression of CXCR3 in the liver. Regulatory T cells (Treg cells) strongly infiltrated the liver in both WT and IL-33(-/-) mice, but Con A treatment increased their membrane expression of ST2 and CD25 only in WT mice. In vitro, IL-33 had a significant survival effect, increasing the total number of splenocytes, including B cells, CD4(+) and CD8(+) T cells, and the frequency of ST2(+) Treg cells. In conclusion, IL-33 acts as a potent immune modulator protecting the liver through activation of ST2(+) Treg cells and control of NK cells.
ISSN: 0193-1857

hal-01366372
https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01366372
https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01366372/document
https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01366372/file/Ablation%20of%20interaction%20between%20IL-33%20and%201%20ST2.pdf
DOI : 10.1152/ajpgi.00097.2016