Etude d'un milieu gélose semi-sélectif pour la recherche de Vibrio penaecida : tests de nouvelles méthodes diagnostiques dans le cadre du programme de recherche sur le syndrome 93 Auteur(s) : Lapouyade, Patrick Résumé : Ce travail décrit la mise au point d'un milieu gélosé semi-sélectif visant à mettre en évidence les Vibrio penaecida en élevage larvaire de pénéides. Le ZoBell-Mannitol-Saccharose-Bleu de bromothymol (ZMSB) a un pH élevé, une forte teneur en sels et ne possède que deux sucres acidifiables, le mannitol et le saccharose. Ce milieu peut être utilisé pour la sélection d'un grand nombre d'espèces du genre Vibrio. La salinité et le ph séparent le germe cherché d'une fraction importante d'espèces de Vibrio, et l'acidification du mannitol et du saccharose révèlent (par le changement de couleur du milieu) les Vibrio de type penaecida qui présentent cette caractéristique. De plus, un milieu minimum comme le ZoBell, additionné de glycérol, permet d'augmenter considérablement la production de pigments noirs (grisâtres) insolubles qui s'accumulent sous forme cristalline chez certaines colonies bactériennes comme Vibrio nigripulchritudo, facilitant ainsi la distinction d'espèces physiologiquement proches comme V. penaecida. Les différents aspects des souches testées sont alors observés par repiquages à l'aide de tampons et permettent d'obtenir des images comparables par superposition. Sur les 26 souches testées une seule présente un aspect comparable à V. penaecida sur ZMSB. Ce Vibrio (V. nigripulchritudo) est facilement différenciable de V. penaecida par culture en milieu ZoBell additionné de glycérol. On peut donc conclure à une bonne spécificité du milieu en question et du procédé de repiquage utilisé. En cas de doutes, la présence de V. penaecida est confirmées par quelques tests biochimiques simples. Un protocoles de fabrication d'un sérum anti V. penaecida est également testé. Droits : 1997 The author, Univ. Caen, Ifremer http://archimer.ifremer.fr/doc/00032/14340/11624.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00032/14340/ | Partager |
Résistance de la crevette Litopenaeus stylirostris à la bactérie pathogène Vibrio penaeicida : Physiologie, immunologie et pathologie comparées d’une population sélectionnée sur un critère de survie aux épisodes de mortalité et d’une population témoin non sélectionnée. Auteur(s) : De Decker, Sophie Résumé : The New-Caledonian shrimp industry is based on the controlled reproduction of the shrimp Litopenaeus stylirostris, a species which was introduced in the 80s. The major difficulty to which the industry has been faced for 10 years is the occurrence of the “Syndrome 93”, which corresponds to mortality phases when the temperature falls down in April-May-June. This mortality is associated to the pathogenic bacteria Vibrio penaecida. An experiment of genetic selection based on the criterion ofsurvival to Syndrome 93 has been conducted at the Laboratory of Aquaculture of New Caledonia. The 3rd selected generation had demonstrated very encouraging results (survival rates improved by around 20% in experimental infections with V. penaeicida). These results have not been confirmed at the 4th generation and no difference in terms of physiology and immunology appears between the selected population and the non-selected control population. The potential causes of these results are examined and proposals for protocol improvements are given. La filière crevette de Nouvelle-Calédonie reposesur la maîtrise de la reproduction contrôlée de la crevette Litopenaeus stylirostris, espèce introduite dans les années 1980. La difficulté majeure que rencontre la filière depuis une dizaine d’années est la récurrence du « Syndrome 93 », qui s’exprime sous forme d’épisodes de mortalités lors des baisses de température aux intersaisons. Ces mortalités sont associées à la bactérie pathogène Vibrio penaeicida Une expérience de sélection sur un critère de survie à des épisodes de Syndrome 93 a été menée au Laboratoire Aquacole de Calédonie. La 3èmegénération sélectionnée avait montré des résultats très encourageants (survies améliorées de l’ordre de 20% lors d’infections expérimentales à V. penaeicida). Ces résultats ne sont pas confirmés en 4ème génération et aucune différence en termes physio-et immunologique n’apparaît entre la population sélectionnée et la population témoin non sélectionnée. Les causes potentielles de ces résultats sont examinées et des propositions d’amélioration de protocoles sont avancées. Droits : 2004 Université de la Rochelle, Ifremer http://archimer.ifremer.fr/doc/00204/31527/29943.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00204/31527/ | Partager |
Amélioration génétique expérimentale de la crevette d'élevage de Nouvelle-Calédonie : Sélection d'une population de L. stylirostris résistante à la bactérie pathogène Vibrio penaeicida. Rapport final pour le Ministère de l'Outre-Mer Auteur(s) : Goyard, Emmanuel Goarant, Cyrille Bachere, Evelyne De Lorgeril, Julien Mugnier, Chantal Ansquer, Dominique Broutoi, Francis Brun, Pierre Résumé : The New-Caledonian shrimp industry is based on the controlled reproduction of the shrimp Litopenaeus stylirostris, a species which was introduced in the 80s. The major difficulty to which the industry has been faced for 10 years is the occurrence of the "syndrome 93", which corresponds to mortality phases when the temperature falls down in April-May-June. This mortality is associated to the pathogenic bacteria Vibrio penaecida and is expressed at different levels which are variable from year ta year and from pond to pond. No resistance to this pathology has been developed spontaneously. This is likely due to the protocole used to rear spawners, which does not allow to implement an efficient selective pressure at each generation
An experimental selection on the criteria of survival after picks of syndrome 93 has been conducted at the Laboratoire Aquacole de Calédonie. The 3rd selected generation demonstrates survival rates improved by 20% during experimental infections with V. penaeicida in comparison with a non selected control population of same genetic origin. The comparison of the correlated responses on the level of expression of 5 genes which are potentially implicated in immunity phenomena (Peneidins, lysozyme, transglutaminase. profiline, annexine) shows that the selected population has a level of expression in lyzozyme twice higher than the control population. This result suggests that the lysozyme could be a genetic marker which could be used in a selective breeding program to he developed in relation with the private hatcheries. La filière crevette de Nouvelle-Calédonie repose sur la maîtrise de la reproduction contrôlée de la crevette Litopenaeus stylirostris, espèce introduite dans les années 80. La difficulté majeure que rencontre la filière depuis une dizaine d'années est la récurrence du « syndrome 93 », qui correspond à des épisodes de mortalités lors des baisses de température en avril-mai-juin. Ces mortalités sont associées à la bactérie pathogène Vibrio penaeicida et s'expriment à des niveaux d'intensité variable d'une année à l'autre et d'un bassin à l'autre. Aucune résistance vis-à-vis de cette pathologie ne s'est développée spontanément. Ceci est vraisemblablement lié au protocole employé pour l'élevage des géniteurs qui ne permet pas d'exercer une pression de sélection efficace à chaque génération. Une expérience de sélection sur un critère de survie à des épisodes de syndrome 93 a été menée au Laboratoire Aquacole de Calédonie. La 3ème génération sélectionnée montre des survies améliorées de l'ordre de 20% lors d'infections expérimentales à V. penaeicida par rapport à une population témoin non sélectionnée de même origine génétique. La comparaison des réponses corrélées sur le niveau d'expression de 5 gènes potentiellement impliqués dans les phénomènes de défense immunitaire (penaeidine, lysozyme, transglutaminase, profiline, annexine) montre que la population sélectionnée a un niveau d'expression en lysozyme deux fois plus élevé que la population témoin. Ce résultat suggère que le lysozyme pourrait être un marqueur génétique utilisable dans un programme de sélection à développer en relation avec les écloseries de production. Droits : 2003 Ifremer http://archimer.ifremer.fr/doc/00109/22020/19643.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00109/22020/ | Partager |