Discovery of novel proteins involved in spermatogenesis in the rat ; Découverte de nouvelles protéines impliquées dans la spermatogenèse chez le rat Auteur(s) : Chocu, Sophie Auteurs secondaires : Institut de recherche, santé, environnement et travail [Rennes] (Irset) ; Université d'Angers (UA) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université de Rennes 1 (UR1) - École des Hautes Études en Santé Publique [EHESP] (EHESP) - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) - Structure Fédérative de Recherche en Biologie et Santé de Rennes ( Biosit : Biologie - Santé - Innovation Technologique ) Université Rennes 1 Charles Pineau Éditeur(s) : HAL CCSD Résumé : Spermatogenesis in mammals is a complex biological function including cellular processes such as proliferation, meiosis and differentiation, aiming to the production of male gametes in the testis. If the seminiferous epithelium is well described in terms of organization and cellular morphology of cells that compose it, the processes by which undifferentiated diploid germ cells enter meiosis and give haploid cells that undergo many morphological transformations, are not fully decrypted. These processes rely on the coordinated and sequential expression of genes, including specific products for each stage of germ cell development These gene products are essential at each key stage of spermatogenesis. Transcriptomics since the 1990s, and proteomics since the 2000s have contributed to the improved. understanding of these mechanisms. A long term proteomic study aiming at characterizing the proteomes of Sertoli cells and germ cells, and a recent study that characterized and quantified the transcriptome of isolated rat testicular cells at high resolution using de novo sequencing of transcripts (RNA-Seq), have been the basis of my thesis work. The latter study showed the accumulation of long non-Coding RNAs (lncRNAs) and testicular unannotated transcripts (TUTs) at meiotic and post-Meiotic stages of spermatogenesis in the rat. In this context, my thesis work aimed at validating the coding potential of many genes expressed in germ cells using RNA-Seq combined with shotgun proteomics, a so-Called PIT (Proteomics Informed by transcriptomics) approach. In this approach, the protein sequences translated from the transcripts assembled by RNA-Seq in the different testicular cell types are integrated into a custom database of protein sequences used to query mass spectrometry data obtained from proteins of meiotic and post-Meiotic cells. The PIT approach showed that 69 TUTs or lncRNA (corresponding to 44 loci) code for proteins in meiotic cells and post meiotic cells, and we confirmed experimentally the meiotic and post-Meiotic expression for two new transcripts encoding for VAMP9, a protein of the SNARE family, and a new testicular enolase T-ENOL. The post-Meiotic expression of T-ENOL protein was confirmed by immunohistochemistry using a polyclonal antibody raised against the recombinant protein. This approach also allowed us to identify new isoforms of known proteins, specific to each stage of spermatogenesis. Germ cells and Sertoli cells maintain a dialogue which is necessary to the success of spermatogenesis and spermiogenesis. Another part of my work aimed at identifying membrane proteins, in germ cells and residual bodies, that may be involved in the dialogue between Sertoli cells and germ cells, using a ICPL relative quantification proteomic approach. The ICPL analysis enabled us to establish a list of 166 proteins whose expression is differential between pachytene spermatocytes, round spermatids and residual bodies. Their differential expression suggests that these proteins may play a role in spermiogenesis. Thanks to the Gene Ontology annotations, a list of 8 proteins with a putative role in signal transduction, cell recognition or differentiation, thus potentially involved in the dialogue between Sertoli and germ cells was drawn. In addition, I provided a first proteome of rat Sertoli cells, germ cells and residual bodies obtained by shotgun proteomics. La spermatogenèse chez les mammifères est une fonction biologique complexe incluant des processus de prolifération cellulaire, de méiose et de différenciation uniques visant à la production des gamètes mâles au sein du testicule. Si l’épithélium séminifère est bien décrit sur le plan de son organisation et de la morphologie des cellules qui le composent, les processus par lesquels les cellules germinales diploïdes indifférenciées entrent en méiose pour donner ensuite des cellules haploïdes subissant par la suite de nombreuses transformations morphologiques, ne sont pas totalement décryptés. Ils reposent sur l’expression coordonnée et séquentielle de gènes dont les produits spécifiques de chaque stade de développement des cellules germinales sont essentiels aux étapes clés de la spermatogenèse. La transcriptomique depuis les années 1990 et la protéomique depuis les années 2000 ont contribué à l’amélioration de la connaissance de ces mécanismes. Une étude protéomique visant à caractériser par des approches systématiques et différentielles les protéomes des cellules de Sertoli et de la lignée germinale, et d’autre part une étude récente, réalisée dans notre unité, qui a permis de caractériser et de quantifier le transcriptome des cellules testiculaires isolées de rat en utilisant le séquençage de novo des transcrits (RNA-Seq), ont été à la base de mes travaux de thèse. Cette dernière étude a mis en évidence l’accumulation de longs ARNs non codants (lncRNAs) et de transcrits testiculaires non annotés (TUTs) aux stades méiotique et post- méiotique de la spermatogenèse chez le rat. Dans ce contexte, mon travail a consisté à valider le potentiel codant de nombreux gènes exprimés dans les cellules germinales par une approche dite PIT (Proteomics Informed by Transcriptomics) couplant protéomique Shotgun et RNA-Seq. Dans ce type d’approche, les séquences protéiques déduites des transcrits des différents types cellulaires, assemblés par RNA-Seq, sont intégrées dans une base personnalisée de séquences protéiques utilisée pour interroger les données de spectrométrie de masse obtenues à partir de protéines de cellules méiotiques et post-Méiotiques. L’approche PIT a permis de montrer que 69 TUTs ou lncRNA (correspondant à 44 loci) codent pour des protéines dans les cellules méiotiques et post méiotiques. L’expression post-Méiotique de deux nouveaux transcrits, l’un codant pour la protéine VAMP9, une protéine de la famille SNARE, et l’autre pour une nouvelle énolase T-ENOL a pu être confirmée. L’expression post-Méiotique de T-ENOL a été confirmée par immunohistochimie à l’aide d’un anticorps polyclonal produit contre la protéine recombinante. Cette approche nous a également permis d’identifier de nouvelles isoformes de protéines connues spécifiques de chaque stade de la spermatogenèse. Les cellules germinales et les cellules de Sertoli entretiennent le dialogue nécessaire au bon déroulement de la spermatogenèse. Une autre partie de mon travail a consisté à identifier des protéines membranaires des cellules germinales et des corps résiduels, susceptibles d’intervenir dans le dialogue entre les cellules de Sertoli et les cellules germinales, par une approche protéomique de quantification relative ICPL. Cette approche a permis d’établir une liste de 166 protéines différentiellement exprimées entre les spermatocytes pachytène, les spermatides rondes et les corps résiduels, qui sont susceptibles de jouer un rôle dans la spermiogénèse. Grâce aux annotations de le Gene Ontology, j’ai pu établir une liste de 8 protéines ayant un rôle supposé dans la transduction du signal, la reconnaissance cellulaire ou bien la différenciation. Par ailleurs, j’ai pu établir par protéomique Shotgun un premier protéome des cellules de Sertoli, des cellules germinales et des corps résiduels chez le rat. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01127389 Droits : info:eu-repo/semantics/OpenAccess NNT : 2014REN1S064 tel-01127389 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01127389 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01127389/document https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01127389/file/2014REN1S064.pdf | Partager |
La cellule, où vécut et travailla Colomb Année de publication : Extrait de : Christophe Colomb vu par un marin (Page 49) Résumé : Cliché représentant la cellule du monastère franciscain de Santa Maria de Rabida (Andalousie, Espagne)où Christophe Colomb fit retraite en 1485 Droits : Domaine public Permalien : http://www.manioc.org/images/PAP110640053i1 PAP110640053i1 | Partager |
Forçat sortant de cellule soit mort, soit fou Auteur(s) : Rouget, François (1811-1887) Pinot Extrait de : Les bagnes : Histoire, Types, Murs, Mystères (p.434) Siècle(s) traité(s) : 19 Droits : Domaine public Permalien : http://www.manioc.org/images/FRA110250494i1 FRA110250494i1 | Partager |
La fenêtre de la cellule de Colomb Année de publication : Extrait de : Christophe Colomb vu par un marin (Page 49) Résumé : Cliché représentant la fenêtre de la cellule du monastère espagnol où Christophe Colomb séjourna quelque temps en 1485. Siècle(s) traité(s) : 15 Droits : Domaine public Permalien : http://www.manioc.org/images/PAP110640053i2 PAP110640053i2 | Partager |
Révélations Auteur(s) : Guilbert Rouget, François (1811-1887) Extrait de : Les bagnes : Histoire, Types, Murs, Mystères (p. 55) Siècle(s) traité(s) : 19 Droits : Domaine public Permalien : http://www.manioc.org/images/FRA110250075i1 FRA110250075i1 | Partager |
Toussaint au Fort de Joux Année de publication : Extrait de : Manuel d'histoire d'Haïti (Page 143) Résumé : Illustration représentant Toussaint Louverture, héros de la Révolution haïtienne,dans sa cellule du fort de Joux (Jura),où il fut déporté en 1802 sur ordre de Napoléon Bonaparte,et où il mourut en 1803. Siècle(s) traité(s) : 19 Droits : Domaine public Permalien : http://www.manioc.org/images/PAP110770153i1 PAP110770153i1 | Partager |
La contamination des organismes aquatiques par la chlordécone : quels impacts sur leur santé ? Auteur(s) : Lemoine, Soazig Année de publication : Loading the player... Éditeur(s) : Université des Antilles AREBio Groupe de recherche BIOSPHERES : BIOlogie, Sciences Physiques & Humaines pour les énergies Renouvelables, l Extrait de : 1er colloque international BIOSPHERES, du 18 au 20 juin 2019. Université des Antilles Description : Chlordecone is a persistent organochlorine pesticide widely used between 1972 and 1993 in the French West Indies to control the root borer in banana fields. Chlordecone use resulted in long-term pollution of soils, contamination of waters, of aquatic organisms, and of fields. Chlordecone is known to be neurotoxic, to increase prostate cancer, and to have negative effects on cognitive and motor development during infancy. In Guadeloupe, most of the freshwater species living in contaminated rivers exceed the French legal limit of 20 ?g·kg?1 wet weight. In the present study (ANR MACHLOMA), we chose a transcriptomic approach to study the cellular effects of chlordecone in the giant freshwater prawn Macrobrachium rosenbergii, an important economical species in Guadeloupe. Droits : CC-BY-NC-ND - Attribution - Pas d'utilisation commerciale - Pas de modification Permalien : http://www.manioc.org/fichiers/V19065 V19065 | Partager |
Phenotypic plasticity in the symbiotic cnidarian Anemonia viridis : stress response at multiple levels of structural complexity ; Plasticité phénotypique chez le Cnidaire symbiotique Anemonia viridis : analyse de la réponse au stress à différents niveaux de complexité structurale Auteur(s) : Ventura, Patrícia Nobre Montenegro Auteurs secondaires : Evolution Paris Seine ; Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC) - Université Nice Sophia Antipolis (UNS) ; Université Côte d'Azur (UCA) - Université Côte d'Azur (UCA) - Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) Université Côte d'Azur Stéphanie Barnay-Verdier Paola Furla Éditeur(s) : HAL CCSD Résumé : During the course of their life cycle organisms are exposed to natural environment variations capable of inducing physiological, morphological and behaviour changes, thus a phenotypic plasticity. Phenotypic plasticity is the ability of a genotype to generate a new phenotype following exogeneous or endogeneous stress. Here, we investigated the phenotypic plasticity of the non-calcifying symbiotic cnidarian Anemonia viridis at multiple levels of structural complexity, in vivo and in vitro. In vivo, we determined the mechanisms behind the phenotypic plasticity under expected future climate change (i.e. ocean acidification and ocean warming). Our results show physiological changes in the inorganic carbon use of the sea anemone A. viridis exposed to high pCO2 during a long-term stress in natura or a short-term stress in controlled conditions. We then observed an equivalent decrease in carbonic anhydrase activity, a key enzyme of cnidarian carbon concentrating mechanisms. Also, we demonstrated that an increase in seawater temperature modified the response observed during a high pCO2 scenario. In vitro, we established a viable primary cell culture from regenerating tentacles of A. viridis. We determined the gastrodermal tissue origin of the cultivated cells and validated the use of this new tool to the in vitro study of stress response at the cellular level. The set-up of this powerful in vitro tool will open a multitude of perspectives for the study of cellular responses to exogeneous stress (as global change perturbations) and to endogeneous stress (as the symbiosis constraints experienced by symbiotic cnidarians) Durant leur cycle de vie, les organismes sont exposés à des variations environnementales capables d'induire des changements physiologiques, morphologiques et comportementaux, résultant d’une plasticité phénotypique. La plasticité phénotypique est la capacité d'un génotype à générer un nouveau phénotype suite à un stress. Ici, nous avons étudié la plasticité phénotypique d’un Cnidaire symbiotique et non-calcifiant, l’anémone de mer Anemonia viridis, à de multiples niveaux de complexité structurale, in vivo et in vitro. In vivo, nous avons identifié les mécanismes sous-jacents de la plasticité phénotypique potentiellement induits par les futurs changements climatiques (acidification et réchauffement des océans). Nos résultats montrent des modifications dans l'utilisation du carbone inorganique par A. viridis exposée à une forte pCO2 lors d’un stress chronique in natura ou lors d’un stress court en conditions contrôlées. Nous avons ainsi observé une diminution des activités anhydrase carbonique, une enzyme clé des mécanismes de concentration du carbone chez les Cnidaires. Nous avons aussi démontré que l'augmentation concomittante de la température modifie la réponse observée lors d'une élévation seule de la pCO2. In vitro, nous avons établi une culture de cellules primaires viables issue de tentacules d’A. viridis en régénération. Nous avons déterminé l'origine gastrodermale des cellules cultivées et validé l'utilisation de ce nouvel outil pour l'étude de la réponse au stress au niveau cellulaire. Ce nouvel outil ouvre une multitude de perspectives pour l'étude des réponses cellulaires aux stress exogènes (changement climatique) et endogènes (contraintes dues à la symbiose) https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01674220 Droits : info:eu-repo/semantics/OpenAccess NNT : 2016AZUR4136 tel-01674220 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01674220 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01674220/document https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01674220/file/2016AZUR4136.pdf | Partager |
Détection de pesticides dans le milieu aquatique au moyen d'algues encapsulées dans un hydrogel de silice Auteur(s) : Durrieu, Claude Année de publication : Loading the player... Éditeur(s) : GFP : Groupe Français des Pesticides Extrait de : "Protection des cultures et santé environnementale : héritages et conceptions nouvelles" : congrès, le 26 mai 2014. Université des Antilles et de la Guyane Description : Bien que la réglementation concernant l'usage des phytosanitaires soit de plus en plus encadrée, la présence de nombreux pesticides persiste dans l'environnement. Le lessivage des surfaces cultivées entraine ces derniers dans les écosystèmes aquatiques dans lesquels on trouve encore des molécules comme l'atrazine dont l'emploi est pourtant interdit en Europe depuis plus de 10 ans. La présence de ces molécules constitue un risque avéré pour la pérennité de la ressource en eau. Ainsi, des outils de monitoring pour une surveillance in situ des écosystèmes deviennent indispensables pour les gestionnaires. C'est dans ce contexte que nous développons des biocapteurs dont le fonctionnement repose sur l'étude de la perturbation du métabolisme de cellules algales immobilisées. Les algues, à la base des chaînes trophiques, sont très sensibles aux pollutions. L'outil proposé possède ainsi une bonne pertinence écologique Siècle(s) traité(s) : 21 Droits : CC-BY-NC-ND - Attribution - Pas d'utilisation commerciale - Pas de modification Permalien : http://www.manioc.org/fichiers/V14251 V14251 | Partager Voir aussi Pesticide Pollution Produits phytosanitaires Ecologie Environnement Ecosystème Algues France Argentine ; Télécharger |
Influence de l'azote et du phosphore sur la croissance et la toxicité de Prorocentrum lima (Ehrenberg) Dodge Auteur(s) : Morlaix, Martine Lassus, Patrick Éditeur(s) : Adac-cryptogamie Résumé : Very few attempts have been made in order to investigate the role of nutrients on cellular growth and toxin production in dinoflagellates associated with DSP (Diarrhetic Shellfish Poison). Some preliminary results are presented here, aiming at a better knowledge of inorganic nitrogen and organic phosphorus effects upon division rate and toxin content of Prorocentrum lima (PL2V spanish strain). Nitrogen have a positive effect on growth rate, up to a threshold value of 880muM.l-1. Above this threshold the rate decreases. There is no effect on toxin content since okadaic acid and DTX1 cell contents remain low (4.8 +/- 0.5 pg.cell.-1) and steady. Phosphorus effect upon division rate follows a non-linear relationship, whereas cellular toxic content is inversely proportional to growth rate. Peu d'études ont été réalisées sur l'influence des nutriments sur la croissance et la toxicité de dinoflagellés producteurs de poisons diarrhéiques (Diarrhetic Shellfish Poison = DSP). Des résultats préliminaires sont présentés ici en ce qui concerne l'effef de concentrations croissantes d'azote inorganique et de phosphore organique sur le taux de division et la production toxinique de Prorocentrum lima (souche espagnole PL2V). L'azote a une influence positive sur la croissance de cette microalgue jusqu'à une valeur seuil de 880 μM.l#-1. Au-delà de ce seuil, le taux de division diminue. Par contre, l'effet sur la toxicité n'est pas significatif, les concentrations en acide okadaïque et DTXI restant relativement faibles (4.8 ± 0.5 pg.cell.· l ) et stables. Le phosphore agit intégralement sur le taux de division et il y a une relation inverse entre ce dernier et le contenu toxinique cellulaire. Cryptogamie Algologie (0181-1568) (Adac-cryptogamie), 1992-08 , Vol. 13 , N. 3 , P. 187-195 Droits : info:eu-repo/semantics/openAccess http://archimer.ifremer.fr/doc/00133/24469/22483.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00133/24469/ | Partager Voir aussi Croissance Toxicité Concentration chimique Division cellulaire Production Espagne Phosphore Azote Europe Nutriment Télécharger |
Fertilité et insuffisance ovarienne : de nouveaux traitements en perspective ? [Ovarian failure: New treatments in perspective?] Auteur(s) : Ravel, C. Kazdar, N. Leveque, J Auteurs secondaires : Institut de recherche, santé, environnement et travail [Rennes] (Irset) ; Université d'Angers (UA) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université de Rennes 1 (UR1) - École des Hautes Études en Santé Publique [EHESP] (EHESP) - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) - Structure Fédérative de Recherche en Biologie et Santé de Rennes ( Biosit : Biologie - Santé - Innovation Technologique ) CHU Pontchaillou [Rennes] Éditeur(s) : HAL CCSD Elsevier Masson Résumé : International audience The premature loss of ovarian function may have physical and psychological consequences. A better understanding of its mechanism is therefore needed. Because they are affecting the oocyte quality, the decline of the ovarian reserve and high maternal age are implicated in many defects leading to chromosomal defects, modifications of gene expression or alterations of the mitochondrial pattern of the oocyte. However, cellular therapies such as ovarian follicle activation or isolation of ovarian stem cells are promising treatments of ovarian failure Le diagnostic d’insuffisance ovarienne chez une femme ayant un projet d’enfanter aura des conséquences non seulement physiques mais également psychologiques. L’optimisation des stratégies de prise en charge thérapeutique nécessite une meilleure compréhension des mécanismes de survenue de cette défaillance. Les mécanismes responsables de la constitution et du maintien de la réserve ovarienne commencent à être élucidés. Avec le déclin de la réserve ovarienne, la qualité ovocytaire diminue, accentuant la baisse de la fertilité associée à l’âge maternel. Les ovocytes et les embryons résultant de patientes âgées présentent des taux d’aneuploïdies élevés, liés à des défauts de cohésion chromosomique et d’instabilité du fuseau méiotique, diminution de la capacité de réparation de l’ADN, altération de l’expression des gènes ou à une altération du fonctionnement mitochondrial. Avec la possibilité d’activer in vitro la folliculogenèse et l’isolement de cellules souches ovariennes, plusieurs pistes de thérapie cellulaire commencent à se développer et semblent très prometteuses. ISSN: 1297-9589 hal-01231432 https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01231432 DOI : 10.1016/j.gyobfe.2015.10.008 PUBMED : 26597936 | Partager |
New cytotoxic cyclic peptide from the latex of Croton urucurana Baillon (Euphorbiaceae) and in vitro investigation of its mechanisms of action ; Un nouveau cyclopeptide cytotoxique extrait du latex de Croton urucurana Baillon (Euphorbiaceae) : étude in vitro de son activité cytotoxique ; Novo ciclopeptídeo citotóxico do látex de croton urucurana baillon (Euphorbiaceae) e investigação de seu mecanismo de ação in vitro Auteur(s) : Cândido Bacani, Priscila de Matos Auteurs secondaires : Institut de recherche, santé, environnement et travail [Rennes] (Irset) ; Université d'Angers (UA) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université de Rennes 1 (UR1) - École des Hautes Études en Santé Publique [EHESP] (EHESP) - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) - Structure Fédérative de Recherche en Biologie et Santé de Rennes ( Biosit : Biologie - Santé - Innovation Technologique ) Université Rennes 1 Georges Baffet Walmir Silva Garcez Éditeur(s) : HAL CCSD Résumé : Croton urucurana Baillon (Euphorbiaceae), plant species popularly known in Brazil as “sangra-d’água”, is commonly found in Mato Grosso do Sul State (midwestern Brazil), where its latex is popularly used to treat several types of cancer. Despite the ethnopharmacological significance of the species, no phytochemical or cytotoxic studies of its latex have been published. In this context, the aim of the present study was to assess the cytotoxic activity of crude extracts, fractions and isolated compound from the latex of C. urucurana and to investigate the effects of crourorb A1 on the viability, apoptosis, cell cycle and cell migration of human hepatocarcinoma cell lines (Huh-7). Also, we have evaluated the viability of Huh-7 cells treated with crourorb A1 in 3D collagen gels. The cytotoxicity was detected using the sulforhodamine B (SRB) assay against six human cancer cells lines and one nontumor NIH/3T3 cell line (murine fibroblast). Studies on the mechanism of cell death of crourorb A1 were conducted in different test systems in vitro. The bioactive ethyl acetate phase obtained from the latex of C. urucurana afforded a novel cyclic peptide, [1−9-NαC]-crourorb A1, that proved active against NCIADR/ RES (ovary, multidrug-resistance phenotype) cells with the same potency as doxorubicin (positive control) and inactive up to the highest concentration tested against nontumor NIH/3T3 cells (GI50 = > 250 μg/mL). Crourorb A1 treatment decreases the cell viability of Huh-7 at dose and time dependent manner associated with induction of apoptosis by caspase 3/7 activation and increasing expression of pro-apoptotic proteins: Bak, Bid, Bax, Puma, Bim, and Bad and clived-caspase3 protein. The JNK/MAP pathway is involved in this induced cell death. Crourorb A1 effect is also associated with G2/M phase cell cycle arrest. In parallel, we observed that crourorb A1 treatment resulted in an increase of cyclin-dependent kinase (CDK1), cyclin B1 and cyclin D1 expressions. A significant reduction of Huh-7 cells migration by crourorb A1 can be assessed and we also show that cells grown on 3D collagen gels exhibited increased resistance to crourorb A1 when compared to 2D cell culture. Croton urucurana Baillon (Euphorbiaceae), est une plante très connue et utilisée en médecine traditionnelle au Brésil, la «sangra-d’água» retrouvée dans l'État du Mato Grosso do Sul (région Centre-Ouest du Brésil). Son latex est abondamment utilisé en médecine traditionnelle dans le traitement de plusieurs types de cancer. En dépit de son importance ethnopharmacologique, on ne trouve aucune étude sur sa composition chimique ou sur sa potentielle activité anti-cancéreuse. L’objectif de ce travail a été d'évaluer l'activité cytotoxique des extraits totaux, fractions d’extraits et de molécules purifiées, isolées du latex de C. urucurana. Nous avons étudié plus particulièrement les effets du crourorb A1 sur la viabilité, l'apoptose, le cycle cellulaire et la migration de cellules issues de carcinome hépatocellulaire humaine (Huh-7). Nous avons également évalué l’effet du crourorb A1sur la viabilité des cellules Huh-7 cultivées dans les gels de collagène en 3D. L' activité cytotoxique ont été réalisées par le test à la sulforhodamine B sur six lignées cellulaire cancéreuses et sur une lignée cellulaire non cancéreuse de fibroblastes murins, les cellules NIH/3T3. L'étude phytochimique de la fraction ‘acétate d'éthyle’ du latex de C. urucurana bioguidé a permis d’obtenir un nouveau cyclopeptide que nous avons nommé [1-9-NαC]-crourorb A1. Le crourorb présente une cytotoxicité puissante sur la lignée cellulaire cancéreuse NCI-ADR/RES (ovaire, le phénotype de multirésistance) à un niveau équivalent à celle de la doxorubicine (témoin positif). Ce composé est de plus pratiquement inactif (GI50 = >250 μg/mL) sur la lignée non cancéreuse NIH/3T3. L'évaluation de la cytotoxicité in vitro du crourorb A1 (test wst1) sur les cellules Huh-7 a démontré que la viabilité des cellules est inhibée de manière dose et temps-dépendant. Nous avons mesuré une forte activation des caspases 3 et 7 et une nette augmentation de l’expression des protéines pro-apoptotiques (Bak, Bid, Bax, Puma, Bim et Bad) ainsi que de la caspase 3 clivée par le crourorb A1. Nous avons également déterminé que la voie de signalisation JNK-MAPkinase semble nécessaire à l’induction de la mort cellulaire des cellules Huh-7 traitées au crourorb A1. Le crourob A1 induit un arrêt du cycle cellulaire en phase G2/M. En parallèle, les expressions de la cycline-dépendante kinase CDK1, des cyclines B1 et D1 sont augmentées après traitement au crourorb A1. De plus, le crourorb A1 a un effet inhibiteur significatif de la migration des cellules Huh-7, en présence ou absence de mitomycine C. Nous avons également confirmé, l’effet inhibiteur du crourob A1 sur la viabilité des cellules Huh7 cultivées en 3D dans les gels de collagène 1 et démontré que les cellules cultivées en 3D semblent plus résistantes au crourorb A1 par rapport aux cultures en monocouche 2D. Croton urucurana Baillon (Euphorbiaceae) é uma espécie arbórea conhecida popularmente no Brasil como “sangra d´água”, comumente encontrada no estado de Mato Grosso do Sul, onde seu látex tem sido utilizado na medicina popular no tratamento de vários tipos de câncer. Apesar de sua importância etnofarmacológica, não há relatos de estudos relacionados à sua composição química ou atividades anticâncer na literatura. Nesse contexto, o objetivo do presente estudo foi avaliar a atividade citotóxica de extratos, fases, frações e da substância isolada do látex de C. ururucurana e investigar os mecanismos celulares e moleculares in vitro responsáveis pela citotoxicidade da substância isolada considerando seu potencial apoptótico e influência sobre a progressão do ciclo celular em uma linhagem de hepatocarcinoma celular humano (Huh-7), bem como, os efeitos desta substância sobre a migração e viabilidade de células Huh-7 cultivadas em geis de colágeno em 3D. O ensaio de citotoxicidade in vitro foi realizado com o corante sulforrodamina B (SRB) em seis linhagens de células neoplásicas humanas e uma linhagem de células não neoplásicas NIH/3T3 (fibloblasto murinho). Os estudos de mecanismos de ação com crourorb A1 foram conduzidos em diferentes sistemas-teste in vitro. O estudo fitoquímico biomonitorado da fase bioativa acetato de etila do látex de C. urucurana resultou no isolamento de um novo ciclopeptídeo denominado [19-NαC]-crourorb A1, que apresentou potente atividade citotóxica frente à linhagem de células neoplásicas NCI-ADR/RES (ovário com fenótipo de resistência a múltiplos fármacos), com a mesma potência que a doxorrubicina (controle positivo), e foi inativa até a maior concentração testada (GI50 = >250 μg/mL) frente à linhagem de células não neoplásicas 3T3. A exposição de células Huh-7 ao crourorb A1 resultou em uma diminuição da viabilidade celular de maneira dose e tempo-dependentes. Nós observamos um aumento da atividade de caspases 3 e 7 e um aumento da expressão de proteínas próapoptóticas (Bak, Bid, Bax, Puma, Bim e Bad) e caspase 3 clivada após tratamento com crourorb A1. Além disso, observamos que a via de sinalização celular MAP/JNK foi necessária para induzir a morte celular em células Huh-7 tratadas com crourorb A1. Os efeitos de crourorb A1 foram também associados com o acúmulo de células na fase G2/M do ciclo celular. Em paralelo, as expressões da cinase dependente da ciclina (CDK1), ciclina B1 e ciclina D1 foram aumentadas após tratamento com crourorb A1. Foi demonstrado também o envolvimento de crourorb A1 na redução da migração de células Huh-7 cultivadas na presença e ausência de mitomicina C. A avaliação da viabilidade de células Huh-7 cultivadas em geis de colágeno em 3D apontou uma maior resistência destas células ao crourorb A1 quando comparadas com a cultura de células em 2D. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01478286 NNT : 2016REN1B010 tel-01478286 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01478286 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01478286/document https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01478286/file/DE-MATOS-CANDIDO-BACANI-Priscila.pdf | Partager |
Etude bactériologique des sédiments abyssaux. Etude de la dynamique des communautés microbiennes et de leurs activités hétérotrophes dans les parcs conchylicoles Auteur(s) : Bianchi, A. Résumé : Bacteriological study of abyssal sediments: During the Demeraby mission of the N/O Jean Charcot in the western Atlantic Ocean, a study of the microflora of the digestive tracts of echinoderms (Holothuroidea of various genera, Asteroidea, Echinoidea) was compared with that of the surrounding sediment. The bacterial concentration observed in the digestive tracts of all the animals studied is higher than that in the surrounding sediments. The largest numbers were always found in the most anterior part of the digestive tracts of the holothurians. In some cases, the increase is considerable (7.10 versus 5.2. 10 cells per millilitre): It indicates a proliferation of bacterial cells in the anterior part of the digestive tract. As the sediment moves through the digestive tract, the bacterial level progressively decreases. In the most posterior part, the concentration is, however, always clearly greater than that in the surrounding sediment. In the case of the holothurian of the genus Deima, analysis according to the Adamsonian principle of comparison shows that the microflora isolated from the various parts of the digestive tract is composed of taxonomic groups showing little resemblance to those isolated from the sediment. In the case of the holothurian of the genus Pseudostichopus, no specialisation of the microflora from digestive tract contents appears with respect to that of the ingested sediment. Examination of metabolic activities suggests a juxtaposition of two types of communities: Free sediment - sediment in transit that complement one other in their enzymatic and nutritional behaviour Indeed, the strains of free sediment seem to be rather suitable for hydrolysing and using carbohydrates, while those of enteric communities prefer the hydrolysis of lipids and proteins and the assimilation of fatty acids, dicarboxylic acids, hydroxylic acids and certain amino acids. Moreover, the enteric microflorae possess a greater nutritional versatility that, linked with its total numbers, has a sizeable catabolic potential. .../... -2- Measurements of heterotrophic activity done by means of 14 C glucose tracers make it possible to show that the metabolic activities of the bacterial communities of superficial abyssal sediments vary according to zones. In the Amazon Cone, a clear glucose mineralization gradient over a distance of a few kilometres can be observed. In the abyssal plain of Demerara heterotrophic activities are slowed in relation to those of the superficial sediments of the Cone of the Amazon, even though the bacterial numbers and the depths are of the same order of magnitude in the two zones. The abundant microflorae associated with the various divisions of digestive tract contents of the Deima abyssal holothurian manifest little metabolic activity as regards the glucose. However, the bacterial communities of Pseudostichopus and Psychropotes manifest very strong heterotrophic activities, increasing from the oesophagus towards the cloaca. Current results are too fragmentary to allow us to observe possible physiological specialisation of enteric bacterial communities enabling the facilitation of digestion processes in the host. Conclusion: In the abyssal environment, characterised by poorly developed bacterial communities, microflorae associated with the digestive tract contents of echinoderms have considerably greater cellular concentrations. By means of their enzymatic equipment, these enteric communities, which complement those of the free microflorae of superficial sediments, can participate in the transformation of organic matter in the abyssal area.
Study of the dynamics of microbial communities and their heterotrophic activities in shellfish farms: From experiments done on the water in the Arcachon basin, trials to quantify and describe the reactivity potential of bacterial communities were performed. Bacterial communities were defined by direct counts, counts after setting them up for cultivation, structure and diversity of these communities, dosage of AMP, ADP, ATP. Two opposite ecological conditions were considered: Autumn conditions (high temperature) and a winter conditions (low temperature). Tubs of sea water of 6 and 60 litres were enriched either with ammonium chloride or a mixture of amino acids, at about 500 uAtg N.L. The experiments lasted 24 hours, with sampling every 3 hours. The autumn community reacted rapidly (6 hours), the response to the enrichment in organic nitrogen being the highest. The structure of the community has unstable immature stages. On the contrary, during the winter experiment, no response could be perceived. This may mean that the latency phase is greater than 24 hours. The structure of this community has mature stages. In conclusion, bacterial communities react in the same way as macroscopic communities. Stable communities are diversified and correspond to mature stages of the ecosystem; the immature stages are unstable and less diversified. This type of experiment has made it possible to bring to light the rapidity of response of bacterial populations, and can be used to define the stability of a bacterial community in a precise biotope.
ETUDE BACTERIOLOGIQUE DES SEDIMENTS ABYSSAUX RESUME Au cours de la mission DEMERABY du n/o Jean CHARCOT en atlantique occidental , une étude de la microflore des tractus digestifs d'Echinodermes (Holothurides de différents genres, Astérides, Echinides) a été comparée à celle du sédiment environnant. La concentration bactérienne observée dans les tractus digestifs de tous les animaux étudiés est supérieure à celle des sédiments environnants. Les effectifs les plus importants sont toujours observés dans la partie la plus antérieure des tractus digestifs des holothuries. Dans certains cas, l'accroissement est considérable (7.10 contre 5,2. 10 cellules/ml) : il indique une prolifération des cellules bactériennes dans la partie antérieure du tractus digestif. Au.cours de la progression du sédiment dans le tractus digestif, la charge bactérienne décroit progressivement. Dans la partie la plus postérieure, la concentration est cependant toujours nettement supérieure à celle du sédiment environnant-. Dans le cas d'une holothurie du genre Deima, l'analyse selon le principe adansonien de comparaison montre que la microflore isolée des différentes parties du tractus digestif est constituée de groupes taxonomiques présentant peu de ressemblance avec ceux isolés du sédiment. Dans le cas d'une holothurie du genre Pseudostichopus il n'apparait pas de spécialisation de la microflore du contenu du tractus digestif par rapport à celle du sédiment ingéré. ¿ ¿ . L'étude des activités métaboliques suggère une juxtaposition de deux types de communautés : sédiment libre-sédiment en transit qui se complètent dans leur comportement enzymatique et nutritionnel. En effet les souches du sédiment libre semblent être plutôt aptes à hydrolyser et à utiliser les glucides, tandis que celles des communautés entériques portent leur préférence sur l'hydrolyse des lipides et protéines et 1'assimilation des acides gras, acides dicarboxyl iques, hydro'xy-acides et certains acides aminés. D'autre part les microflores entériques possèdent une versatilité nutritionnelle plus importante qui, liée à leurs effectifs, offre une potentialité catabolique non négligeable. .../... -2- Les mesures d'activité hétérotrophe effectuées au moyen de traceurs glucose 14 C permettent de montrer que les activités métaboliques des communautés bactériennes des sédiments abyssaux superficiels varient selon les zones. Dans le Cone de l'Amazone on observe un net gradient de minéralisation du glucose sur une distance de quelques kilomètres. Dans la plaine abyssale de Demerara les activités hétérotrophessont ralenties par rapport à celles des sédiments superficiels du Cone de l'Amazone, bien que les effectifs bactériens et les profondeurs soient du même ordre de grandeur dans ces deux zones. Les abondantes microflores associées aux différentes fractions du contenu du tractus digestif de l'holothurie abyssale Deima ne manifestent que peu d'activités métaboliques vis à vis du glucose. Par contre les communautés . bactériennes de Pseudostichopus et P syahropotes manifestent des activités hétérotrophes très fortes, croissant de 1'oesophage vers le cloaque. Les résultats actuels sont trop fragmentaires pour permettre d'observer une éventuelle spécialisation physiologique des communautés bactériennes entëriques permettant de faciliter les processus de digestion chez l'hôte. Conclusion: dans le milieu abyssal, caractérisé par des communautés bactériennes faiblement développées, les microflores associées aux contenus de tractus digestif des Echinodermes présentent des concentrations cellulaires considérablement plus importantes. Par leurs équipements enzymâtiques ces communautés entëriques complémentaires de ceux des microflores libres des sédiments superficiels, peuvent participer à la transformation des matières organiques du domaine abyssal. ETUDE DE LA DYNAMIQUE DES COMMUNAUTES MICROBIENNES ET DE LEURS ACTIVITES HETEROTROPHES DANS LES PARCS CONCHYLICOLES RESUME A partir d'expérimentations effectuées sur l'eau du bassin d'Arcachon, des essais de quantification et qualification du potentiel de réactivité des communautés bactériennes ont été effectuées. Les communautés bactériennes ont été définies par comptage directs, comptages après mise en culture, structure et diversité de ces communautés, dosage des AMP, ADP, ATP. Deux situations écologiques opposées ont étées considérées . Une situation automnale (température élevée) et une situation hivernale (température faible). Des bacs d'eau de mer de 6 et 60 litres ont été enrichis , soit avec du chlorure d'ammonium, soit avec un mélange d'acides aminés, à environ 500 uAtg N.l" . Les expériences ont duré 24 heures, avec des prélèvements toutes les 3 heures. La communauté automnale réagit rapidement (6 heures), la ' réponse à l'enrichissement en azote organique étant la plus importante. La structure de la communauté présente des stades immatures instables. Au contraire, au cours de l'expérimentation hivernale, aucune réponse n'a pu être perçue. Ceci peut signifier que la phase de latence est supérieure à 24 heures. La structure . de cette communauté présente des stades matures. En Conclusion, les communautés bactériennes réagissent de la même façon que les communautés macroscopiques. Les communautés stables sont diversifiées et correspondent à des stades matures de l'écosystème, les stades immatures sont instables et moins diversifiés. Ce type d'expérience a permi de mettre en évidence la rapidité de réponse des populations bactériennes, et peut être utilisé pour définir la stabilité d'une communauté bactérienne dans un biotope précis. Droits : info:eu-repo/semantics/openAccess http://archimer.ifremer.fr/doc/1981/rapport-1926.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00000/1926/ | Partager |
Challenging the scenrairos of metazoan emergence of nervous system and evolution of mechanisms regulating cell proliferation : new insights from the studies of a cnidarian and a ctenophore ; Origine(s) du système nerveux des Métazoaires et évolution des mécanismes liés au contrôle de la prolifération cellulaire : apports de l'étude chez un Cténaire et un Cnidaire Auteur(s) : Coste, Alicia Auteurs secondaires : Evolution Paris Seine ; Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC) - Université Nice Sophia Antipolis (UNS) ; Université Côte d'Azur (UCA) - Université Côte d'Azur (UCA) - Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) Université Pierre et Marie Curie - Paris VI Michaël Manuel Éditeur(s) : HAL CCSD Résumé : Due to their phylogenetic position outside from Bilateria, cnidarians and ctenophores are key phyla to understanding the origin and early evolution of molecular mechanisms, cell types, or body plan features at the level of Metazoa. Unlike other non-bilaterian phyla (sponges and placozoans), they possess neurons and muscle cells. The first part of my work relates to the problem of the origin of the metazoan nervous system. Recent studies have suggested a dual origin for nerve cells, with ctenophore neurons having emerged independently from those of cnidarians and bilaterians. This hypothesis relies on phylogenomic analyses supporting ctenophores as sister-group to all other metazoans, and on the purported absence in ctenophores of almost all well-known neuro-transmission systems, including the cholinergic system. Refuting this claim, I present substantial evidence in favour of acetylcholine (Ach) being used in the ctenophore Pleurobrachia pileus as an extra-cellular messenger, including within the nervous system. This conclusion arises from the conjunction of multiple approaches at the molecular scale (orthology analyses, Ach immuno-localisation, gene in situ hybridisation), at the cellular scale (calcium imaging on muscle cells exposed to Ach) and at the organism scale (pharmacological treatments with an Ach analogue and Ach antagonists). In the second part of my thesis, I address the conservation of molecular mechanisms involved in the control of cellular proliferation. Notably, the Hippo pathway is known for its role in bilaterians in the negative control of cellular proliferation. I show that components of this pathway are conserved in Pleurobrachia pileus and in Clytia hemisphaerica and that the nuclear vs. cytoplasmic localisation of the transcriptional co-factor Yorkie is correlated to the extent of proliferation within C. hemisphaerica tissues. Finally, RNAseq differential gene expression analyses along a cellular conveyor belt of the C. hemisphaerica medusa suggests a tendency for conservation of function among a set of genes whose mammalian orthologues have documented roles in the arrest of cellular proliferation. Les Cnidaires et les Cténaires sont deux embranchements extérieurs aux Bilatériens qui, de par leur position phylogénétique, constituent des modèles d'étude cruciaux pour comprendre l'origine et l'évolution de mécanismes moléculaires ou encore de types cellulaires à grande échelle chez les Métazoaires. Ils sont les deux seuls embranchements non-Bilatériens à posséder des cellules nerveuses ainsi que des cellules musculaires. La première partie de mon travail de thèse s'inscrit dans le contexte de la compréhension de l'origine du système nerveux des Métazoaires. Des études récentes suggèrent une origine double du système nerveux ; ainsi celui des Cténaires aurait été acquis de manière convergente par rapport à celui des Cnidaires et des Bilatériens. Cela repose sur des données récentes de phylogénomique proposant les Cténaires en tant que groupe-frère de tous les autres Métazoaires et sur l'absence supposée chez les Cténaires de quasiment tous les systèmes de neurotransmission connus y compris le système cholinergique. A l'encontre de ces hypothèses, j'ai pu mettre en évidence l'existence d'un système cholinergique chez le Cténaire Pleurobrachia pileus ainsi que son étroite association avec le système nerveux. Cette conclusion repose sur une multiplicité d'approches à l'échelle moléculaire (analyses d'orthologie, immunolocalisation, hybridations in situ), cellulaire (imagerie calcique) et de l'organisme (approche pharmacologique). Dans la seconde partie de ma thèse, j'aborde la question de la conservation des mécanismes moléculaires impliqués dans le contrôle de la prolifération cellulaire à l'échelle des Métazoaires. J'ai pu mettre en évidence la conservation des acteurs. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01633223 NNT : 2015PA066629 tel-01633223 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01633223 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01633223v2/document https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01633223/file/2015PA066629.pdf | Partager |
A Functional Study of Transforming Growth Factor-Beta from the Gonad of Pacific Oyster Crassostrea gigas Auteur(s) : Corporeau, Charlotte Groisillier, Agnes Jeudy, Alexandra Barbeyron, Tristan Fleury, Elodie Fabioux, Caroline Czjzek, Mirjam Huvet, Arnaud Éditeur(s) : Springer Résumé : The transforming growth factor (TGF)-beta superfamily is a group of important growth factors involved in multiple processes such as differentiation, cell proliferation, apoptosis and cellular growth. In the Pacific oyster Crassostrea gigas, the oyster gonadal (og) TGF-beta gene was recently characterized through genome-wide expression profiling of oyster lines selected to be resistant or susceptible to summer mortality. Og TGF-beta appeared specifically expressed in the gonad to reach a maximum when gonads are fully mature, which singularly contrasts with the pleiotropic roles commonly ascribed to most TGF-beta family members. The function of og TGF-beta protein in oysters is unknown, and defining its role remains challenging. In this study, we develop a rapid bacterial production system to obtain recombinant og TGF-beta protein, and we demonstrate that og TGF-beta is processed by furin to a mature form of the protein. This mature form can be detected in vivo in the gonad. Functional inhibition of mature og TGF-beta in the gonad was conducted by inactivation of the protein using injection of antibodies. We show that inhibition of og TGF-beta function tends to reduce gonadic area. We conclude that mature og TGF-beta probably functions as an activator of germ cells development in oyster. Marine Biotechnology (1436-2228) (Springer), 2011-10 , Vol. 13 , N. 5 , P. 971-980 Droits : Springer Science+Business Media, LLC 2011 http://archimer.ifremer.fr/doc/00042/15371/13438.pdf DOI:10.1007/s10126-010-9361-4 http://archimer.ifremer.fr/doc/00042/15371/ | Partager |
Growth patterns of natural seawater bacterial communities incubated in situ. Auteur(s) : Turley, C Lochte, K Éditeur(s) : Actes de colloques. Ifremer Brest [ACTES COLLOQ. IFREMER.]. 1986 Résumé : Using in situ incubations in dialysis bags of natural bacterial communities, the change in growth rates over a 2-day period has been studied for the community as a whole and for different morphological groups within the community. A sequence of events during growth of both communities well above (4m) and well below (60m) the thermocline in the stratified waters, close to a shallow sea front in the Irish Sea, was noted. There was evidence not only of a periodic pattern of growth of the whole bacterial community but also of synchronous cell division of groups within the community. An increase in mean cell volume of both 4 m and 60 m bacterial communities preceded an increase in specific growth rate which usually coincided with a decrease in mean cell volume. There are distinct differences in numbers of phytoplankton, protozooplankton, macrozooplankton and fish between the waters above and below the thermocline. Some of these organisms exhibit diurnal rhythms and their possible influence on the growth rates and rhythms of bacterial communities in each water mass is discussed. Les modifications du taux de croissance d'une communauté naturelle de bactéries, prise dans son ensemble, et des différents groupes morphologiques la constituant sont étudiées sur une période de 2 jours par incubations in situ dans des sacs à dialyse. Les phénomènes successifs survenant durant la croissance de la communauté sont étudiés à la fois nettement au-dessus (4m) et au-dessous (60m) de la thermocline dans des eaux stratifiées, à proximité d'un front côtier en mer d'Irlande. Il est mis en évidence, non seulement des phases périodiques de croissance sur toute la communauté bactérienne, mais également une division synchrone des cellules dans les différents groupes de la communauté. Une augmentation du volume moyen des cellules des deux communautés des 4 et 60 m précède une augmentation du taux de croissance spécifique, qui coïncide généralement avec une diminution du volume cellulaire moyen. La communauté présente à 4 m, dans son ensemble, mais aussi les deux groupes morphologiques (cocci et bâtonnets) qui la composent, ont des temps de génération proches de la journée. Toutefois, la plupart des formes coccoides se divisent pendant la nuit, et la plupart des formes en bâtonnet se divisent pendant la journée. Réciproquement, à 60 m, la plupart des bâtonnets se divisent pendant la nuit, tout en ayant le même temps de génération qu'à 4 m. La plupart des cocci se divisent pendant la journée et ont un temps degeneration plus faible (presque trois jours). Ceci fait passer le temps de génération de l'ensemble de la communauté des 60 m à 2 jours. Des différences nettes sont observées dans les numérations de phytoplancton, protozooplancton, macrozooplancton et poissons entre les eaux situées au-dessus et au dessous de la thermocline. Plusieurs de ces organismes présentent des rythmes diurnes et leur influence possible sur les taux de croissance et rythmes des communautés bactériennes dans chacune de ces masses d'eau est discutée. Droits : info:eu-repo/semantics/openAccess http://archimer.ifremer.fr/doc/1984/acte-951.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00000/951/ | Partager |
Role of IL-33 in the hepatic immune response during visceral leishmaniasis ; Place de l'Interleukine-33 dans la réponse immune du foie au cours de la leishmaniose viscérale Auteur(s) : Rostan, Octavie Auteurs secondaires : Institut de recherche, santé, environnement et travail [Rennes] (Irset) ; Université d'Angers (UA) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université de Rennes 1 (UR1) - École des Hautes Études en Santé Publique [EHESP] (EHESP) - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) - Structure Fédérative de Recherche en Biologie et Santé de Rennes ( Biosit : Biologie - Santé - Innovation Technologique ) Institut de recherche en santé environnement et travail -- Rennes Université Rennes 1 Jean-Pierre Gangneux Florence Robert-Gangneux Éditeur(s) : HAL CCSD Résumé : Visceral leishmaniasis is a life-threatening systemic disease caused by Leishmania protozoans, L. donovani and L. infantum, which invade mononuclear phagocytes in the lymphoid organs and the liver. The control of the hepatic parasite burden depends on the granuloma formation, which is favored by a Th1 immune response in a Th2 tissue microenvironment. The aim of this work was to study the role of the recently described Th2 cytokine IL-33 in this complex immune response, which remains partially misunderstood. IL-33 dosages in different patient sera and IL-33+ cells detected in the liver of a patient from Rennes suggested that IL-33 could be a biomarker for active visceral leishmaniasis. As IL-33 was described in hepatic stellate cells during chronic hepatitis, these cells were exposed to L. donovani in primary culture. The cell permissivity to L. donovani and the parasite persistence during a long term culture led us to propose hepatic stellate cells as a new type of sanctuary cells, which could partially explain asymptomatic carriage. However, these cells were apparently not the main source of IL-33 during visceral leishmaniasis. In infected BALB/c and C57BL/6 mice, IL-33 was detected in the liver in non stellate cells preferentially localized in granulomas. The presence of cells expressing its specific receptor ST2 in the liver led us to explore the role of the IL-33/ST2 axis. BALB/c mice deficient in ST2 or treated with recombinant IL-33 and infected with L. donovani revealed that IL-33 downregulates the expression of Th1 key cytokines (IL-12, IFN-γ) and the recruitment of neutrophils and monocytes. Finally, IL-33 acts as a susceptibility factor during visceral leishmaniasis. Besides, the model of L. donovani infected C57BL/6 mice deficient in IL-33 or treated with recombinant IL-33 suggests possible differential roles of IL-33 depending on the immune environment related to the host genetic background. La leishmaniose viscérale est une maladie systémique mortelle en l’absence de traitement. Elle est due aux protozoaires Leishmania donovani et L. infantum, parasites des phagocytes mononucléés, capables d’envahir les organes lymphoïdes et le foie. Le contrôle de l’infection hépatique repose sur la mise en place d’une réponse granulomateuse efficace, promue par une réponse immunitaire Th1, dans un environnement tissulaire Th2. L’objectif de ce travail était l'étude du rôle d’une cytokine Th2 récemment décrite, l’IL-33, dans cette réponse hépatique complexe encore partiellement incomprise. Des dosages d’IL-33 sur des sérums de patients et la détection de cellules IL-33+ dans le foie d’un patient rennais ont placé l’IL-33 comme un biomarqueur possible de la maladie active. L’IL-33 étant exprimée dans les cellules étoilées du foie au cours d’hépatites chroniques, ces cellules ont été exposées à L. donovani. Leur permissivité aux leishmanies sans toxicité apparente ni perturbation de leurs propriétés fonctionnelles, ainsi que la persistance des leishmanies sur une culture de plusieurs semaines, nous ont conduit à proposer les cellules étoilées comme cellules sanctuaires possibles pour les leishmanies viscérotropes, contribuant donc potentiellement au portage asymptomatique. En revanche, elles ne sont pas apparues comme une source majeure d'IL-33 au cours de la leishmaniose viscérale. Chez des souris C57BL/6 et BALB/c infectées par L. donovani, l'IL-33 a été observée dans des cellules ne s'apparentant pas à des cellules étoilées, et principalement localisées dans les granulomes. Des cellules exprimant son récepteur ST2 ayant été également observées dans le foie, un rôle de l’axe IL-33/ST2 a été recherché. Les résultats obtenus chez des souris BALB/c déficientes en ST2 ou traitées par de l'IL-33 recombinante suggèrent que l'IL-33 régule négativement l'expression de cytokines Th1 (IL-12, IFN-γ) et l'infiltrat de neutrophiles et monocytes dans le foie, limitant ainsi le contrôle de la charge parasitaire. Ainsi, l'IL-33 semble être un facteur de susceptibilité pour la leishmaniose viscérale. En parallèle, des travaux entrepris sur des souris C57BL/6 infectées par L. donovani suggèrent de possibles rôles différentiels de l'IL-33 en fonction de l'environnement immunitaire inhérent au fond génétique de l'hôte. https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01126847 Droits : info:eu-repo/semantics/OpenAccess NNT : 2013REN1B002 tel-01126847 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01126847 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01126847/document https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01126847/file/2013REN1B002.pdf | Partager |
Role of bacteria in the gastral cavity of Anthozoa. Auteur(s) : Herndl, G Velimirov, B Éditeur(s) : Actes de colloques. Ifremer Brest [ACTES COLLOQ. IFREMER.]. 1986 Résumé : Bacterial density of the coelenteric fluid (CF) of some anthozoan species was determined in situ and under laboratory conditions. In all species examined bacterial density of the CF was higher in the gastral cavity than in ambient ranging from 10 super(5) up to 5 x 10 super(6) cells. ml super(-1). Incubation experiments with the CF indicate that a bacterial population within the coelenteron is efficiently controlled by the CF, favoring bacterial growth if bacterial densities are low in the CF and showing clearance activity at high bacterial densities. Feeding of pre-starved anthozoans caused a rapid response of coelenteric rod-shaped bacteria. Evidence is presented that coelenteric bacteria are digested periodically although they contribute 1% to the respiratory carbon losses of the antozoans tested. Therefore, it is more likely that the coelenteric bacterial population provide other substances which cannot be synthesized by the host. La densité des bactéries du fluide gastrique de différents anthozoaires a été déterminée in situ et au laboratoire. Pour toutes les espèces étudiées, la densité des bactéries dans le fluide gastrique était plus élevée que dans l'eau ambiante et comprise entre 105et 106 cellules m"1. Des expériences d'incubation du fluide gastrique montrent que la population bactérienne est contrôlée efficacement par ce fluide gastrique, favorisant la croissance de bactéries lorsque la densité est faible mais révélant des activités de digestion lorsque la densité est élevée. En nourrissant des anthozoaires mis àjeun plusieurs jours, on provoque une réaction rapide des bactéries déforme bacillaire. Certaines observations montrent que les bactéries gastriques se développent et sont digérées par cycle dans le coelenteron. Néanmoins, la contribution en carbone de ces dernières, comparée aux pertes d'énergie par Sa respiration, représenterait moins de i ','-£. li est probable que cette population bactérienne fournisse des substances qui ne peuvent être synthétisées par i'hôte. Droits : info:eu-repo/semantics/openAccess http://archimer.ifremer.fr/doc/1984/acte-989.pdf http://archimer.ifremer.fr/doc/00000/989/ | Partager Voir aussi Anthozoa Coelomic fluids Bacteria Microorganisms Interspecific relationships Metabolism Nutrition Télécharger |
Autophagy and senescence, stress responses induced by the DNA-damaging mycotoxin alternariol. Auteur(s) : Solhaug, Anita Torgersen, M L Holme, J A Lagadic-Gossmann, Dominique Eriksen, G S Auteurs secondaires : Department of Chemistry and Toxicology ; Norwegian Veterinary Institute Oslo University Hospital ; Oslo University Hospital Centre for Cancer Biomedicine ; Oslo University Hospital Division of Environmental Medicine ; Norwegian Institute of Public Health Institut de recherche, santé, environnement et travail [Rennes] (Irset) ; Université d'Angers (UA) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université de Rennes 1 (UR1) - École des Hautes Études en Santé Publique [EHESP] (EHESP) - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) - Structure Fédérative de Recherche en Biologie et Santé de Rennes ( Biosit : Biologie - Santé - Innovation Technologique ) Éditeur(s) : HAL CCSD Elsevier Résumé : International audience The mycotoxin alternariol (AOH), a frequent contaminant in fruit and grain, is known to induce cellular stress responses such as reactive oxygen production, DNA damage and cell cycle arrest. Cellular stress is often connected to autophagy, and we employed the RAW264.7 macrophage model to test the hypothesis that AOH induces autophagy. Indeed, AOH treatment led to a massive increase in acidic vacuoles often observed upon autophagy induction. Moreover, expression of the autophagy marker LC3 was markedly increased and there was a strong accumulation of LC3-positive puncta. Increased autophagic activity was verified biochemically by measuring the degradation rate of long-lived proteins. Furthermore, AOH induced expression of Sestrin2 and phosphorylation of AMPK as well as reduced phosphorylation of mTOR and S6 kinase, common mediators of signaling pathways involved in autophagy. Transmission electron microscopy analyzes of AOH treated cells not only clearly displayed structures associated with autophagy such as autophagosomes and autolysosomes, but also the appearance of lamellar bodies. Prolonged AOH treatment resulted in changed cell morphology from round into more star-shaped as well as increased β-galactosidase activity. This suggests that the cells eventually entered senescence. In conclusion, our data identify here AOH as an inducer of both autophagy and senescence. These effects are suggested to be to be linked to AOH-induced DSB (via a reported effect on topoisomerase activity), resulting in an activation of p53 and the Sestrin2-AMPK-mTOR-S6K signaling pathway. ISSN: 0300-483X hal-01117627 https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01117627 https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01117627/document https://hal-univ-rennes1.archives-ouvertes.fr/hal-01117627/file/Autophagy%20and%20senescence_accepted.pdf PUBMED : 25456271 | Partager |
Characterization of glutathione peroxidase diversity in the symbiotic sea anemone Anemonia viridis Auteur(s) : Pey, Alexis Zamoum, Thamilla Christen, Richard Merle, Pierre-Laurent Furla, Paola Auteurs secondaires : Symbiose Marine (SM) ; Systématique, adaptation, évolution (SAE) ; Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC) - Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) - Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC) - Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) - Evolution Paris Seine ; Université Nice Sophia Antipolis (UNS) ; Université Côte d'Azur (UCA) - Université Côte d'Azur (UCA) - Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) - Université Pierre et Marie Curie - Paris 6 (UPMC) - Université Nice Sophia Antipolis (UNS) ; Université Côte d'Azur (UCA) - Université Côte d'Azur (UCA) - Université des Antilles et de la Guyane (UAG) Éditeur(s) : HAL CCSD Elsevier Résumé : International audience Cnidarians living in symbiosis with photosynthetic dinoflagellates (commonly named zooxanthellae) are exposed to high concentrations of reactive oxygen species (ROS) upon illumination. To quench ROS production, both the cnidarian host and zooxanthellae express a full suite of antioxidant enzymes. Studying antioxidative balance is therefore crucial to understanding how symbiotic cnidarians cope with ROS production. We characterized glutathione peroxidases (GPx) in the symbiotic cnidarian Anemonia viridis by analysis of their isoform diversity, their activity distribution in the three cellular compartments (ectoderm, endoderm and zooxanthellae) and their involvement in the response to thermal stress. We identified a GPx repertoire through a phylogenetic analysis showing 7 GPx transcripts belonging to the A. viridis host and 4 GPx transcripts strongly related to Symbiodinium sp. The biochemical approach, used for the first time with a cnidarian species, allowed the identification of GPx activity in the three cellular compartments and in the animal mitochondrial fraction, and revealed a high GPx electrophoretic diversity. The symbiotic lifestyle of zooxanthellae requires more GPx activity and diversity than that of free-living species. Heat stress induced no modification of GPx activities. We highlight a high GPx diversity in A. viridis tissues by genomic and biochemical approaches. GPx activities represent an overall constitutive enzymatic pattern inherent to symbiotic lifestyle adaptation. This work allows the characterization of the GPx family in a symbiotic cnidarian and establishes a foundation for future studies of GPx in symbiotic cnidarians. ISSN: 0300-9084 hal-01404424 http://hal.upmc.fr/hal-01404424 http://hal.upmc.fr/hal-01404424/document http://hal.upmc.fr/hal-01404424/file/Pey_Characterization_of.pdf DOI : 10.1016/j.biochi.2016.10.016 | Partager |